ActinRed 555 Probes细胞骨架探针由Flour 荧光染料与鬼笔环肽偶联而成。这些荧光标记的鬼笔环肽对于不同物种(包括动植物)的细胞骨架肌动蛋白具有相同的结合特性。此外,这些鬼笔环肽偶联物对 F-肌动蛋白具有高亲和性和高选择性,广泛用于多色成像研究领域。
产品特性:
对 F-肌动蛋白具有高选择性
多色荧光选择
光稳定性佳
优于抗体染色
染色方法:
注意:对于某些特定的实验体系,我们提供的染色方案可能需要优化。但在大多数情况下,按照本操作说明可取得一致的结果。
以下方法以细胞爬片的染色步骤为例:
1. 用 PBS(pH7.4)轻轻洗涤细胞爬片。
2. 用 3.7%的多聚甲醛(PBS 配制)室温固定细胞,时间为 10 分钟。
注意:甲醇在固定过程中可能会破坏细胞肌动蛋白,因此最好避免任何含甲醇的固定剂。首选的固定剂是不含甲醇的多聚甲醛溶液。
3. 用 PBS 清洗细胞样品两遍或以上。
4. 将细胞爬片至于干净的玻璃培养皿中,用含 0.1% Triton X-100 的 PBS 缓冲液室温透化样本,处理时间 3-5 分钟。(也可使用丙酮溶液透化处理,但需至于-20℃)
5. 用 PBS 清洗细胞样品两遍或以上。
6. 用含 1% BSA 的 PBS 封闭细胞,时间为 20-30 分钟。
7. 向细胞爬片上滴加两滴ActinRed 555 Probes,室温避光孵育 30 分钟。为避免染料蒸发,请将爬片置于密闭的湿盒中。
8. 用 PBS 清洗细胞样品两遍或以上。
9. 如需长期保存,请将细胞样品至于空气中自然晾干,并用封片剂封片。储存于 2-6℃避光环境下的样品正常可至少保存半年。
案例分析:
注意事项:
荧光染料不可避免的存在淬灭问题,请存放操作时注意避光,以减缓荧光的淬灭。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。