名称:5637(人膀胱癌细胞)
来源:膀胱癌;男性;68岁
细胞形态:上皮细胞样
细胞类型:肿瘤细胞
生长特性:贴壁细胞
致瘤性:yes, within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.
培养条件:1640+10% FBS+1% P/S
培养环境:空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5%
细胞简介:5637细胞来源于68岁白人男性的膀胱癌,能产生SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。5637细胞可以用于3D细胞培养和癌症研究,也是一种合适的转染宿主。
换液周期:2-3天
培养基体积:T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例:1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
细胞照片:

传代方法:
1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意严格控制消化时间,消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
冻存液配方:92%FBS+8%DMSO
冻存规格:200-300万/ml,1ml每管
冻存方法:
1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案